细菌培养的过程,从冷冻的菌 到摇瓶实验 经过几个步骤?最好详细点
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发布时间:2022-04-24 11:47
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热心网友
时间:2023-10-11 17:33
复苏 平板划线培养 挑单菌落 中试管扩增 摇瓶扩增
1.复苏:根据所培养的细菌选择适宜的培养基,大部分细菌在LB培养基中在超净工作台先用1毫升左右的适宜的培养基溶解冷冻菌,然后转移到10毫升中试管(放入4毫升液体培养基)中,一般在37摄氏度摇床静止或低转速培养12小时或者过夜(温度取决于所培养的细菌适宜生长的温度)。
2.平板划线培养:在平板(琼脂+液体培养基)划线,放37摄氏度培养箱培养箱中倒置培养6小时~12小时,在平板上观察是否形成了单菌落.
3. 挑单菌落:在超净台中挑选典型单菌落,置入10毫升中试管(内有5毫升液体培养基)中,在37摄氏度摇床,转速200转培养12小时或者过夜,肉眼能看到试管浑浊。
3.按照1:20的比例将中试管中的菌液移到250毫升三角瓶(放入100毫升液体培养基),,培养条件同前。注意:所有的接种操作均需要在层流罩中,培养基应无菌。
热心网友
时间:2023-10-11 17:33
楼上说的挺全。
不过我们一般做的时候,是省略第一步复苏的。
直接拿烧热的接种环挑些菌液冰水,在平板上划线培养。
等长出菌落后,选取合适的菌落摇瓶培养。(要看菌落特征和镜检)。